以灵芝孢子粉为原料，使用体积分数为70%的乙醇为提取剂，采用酶解与超声辅助提取相结合的方法，将不同液固比、超声时间、酶解时间和酶用量设定为4个因素，进行单因素试验并设计响应面试验，以确定最优提取方式及其影响因素.利用大孔树脂层析法对灵芝三萜进行分离纯化，通过优化分离纯化工艺，确定最佳洗脱树脂、洗脱液体积分数、上样液流速以及上样液质量比.采用高效液相色谱法分析灵芝总三萜的组分差异.通过预实验分析，与单一提取法相比，酶+超声辅助提取更高效.采用乙醇为提取剂提取灵芝中三萜类化合物可提高三萜的纯度.最优条件下可实现对三萜含量的快速、精确测定，为灵芝三萜的分离纯化提供理论依据.