目的：探讨罗伊氏乳杆菌对轮状病毒（RV） SA11株体内外复制的抑制作用，并阐明其对相关免疫因子表达的影响。方法：体外实验，培养并鉴定罗伊氏乳杆菌，绘制罗伊氏乳杆菌标准曲线和生长曲线，筛选罗伊氏乳杆菌培养最佳时间和最适浓度。采用5×10～8、10×10～8、50×10～8、100×10～8、200×10～8和500×10～8 CFU·mL^-1罗伊氏乳杆菌感染细胞，台盼蓝染色法检测Caco-2细胞存活率。将不同浓度罗伊氏乳杆菌与RV体外共孵育并作用于Caco-2细胞，Caco-2细胞分为阴性对照组（NC组）、阳性对照组（PC组）和10～7、10～8、10～9及10¹⁰ CFU·mL^-1罗伊氏乳杆菌组，免疫荧光灶法检测罗伊氏乳杆菌作用后Caco-2细胞中病毒滴度，实时荧光定量PCR （RT-qPCR）法检测不同浓度罗伊氏乳杆菌作用后Caco-2细胞中RV VP6基因拷贝数。体内实验，将25窝SPF级乳鼠分为对照组、RV组（感染SA11毒株）、Ab-NC组（抗生素处理耗竭肠道菌群）、Ab-RV组（耗竭肠道菌群后感染SA11毒株）和Ab-Lac-RV组（耗竭肠道菌群，并感染罗伊氏乳杆菌后感染SA11毒株）。收取各组乳鼠灌胃第2、4、6、8和10天的粪便样本和灌胃第4天结肠组织样本，RT-qPCR法检测各组乳鼠粪便中RV VP6基因拷贝数和结肠组织中白细胞介素（IL）-1β、IL-8、IL-10、γ干扰素（IFN-γ）和肿瘤坏死因子（TNF）-αmRNA表达水平。结果：罗伊氏乳杆菌生长良好，形态圆润，呈圆形、光滑和乳白色的凸起样菌落，且边缘较整齐；革兰染色后菌体呈紫色、不规则和方形杆状；经16SrDNA测序后序列同源性为99%，提示罗伊氏乳杆菌活化成功；罗伊氏乳杆菌活菌数与吸光度（A）值呈线性关系，回归分析标准曲线为Y=0.437 5X+0.000 6,R2=0.999 4。培养0～2 h，细菌处于对数生长期，细菌生长迟缓；培养2～14 h，细菌快速生长，并于培养14～16 h时细菌生长趋于稳定，培养16 h时达到细菌生长速率顶峰，随后进入衰亡期。5×10～8、10×10～8、50×10～8、100×10～8和200×10～8 CFU·mL^-1罗氏乳杆菌感染后，Caco-2细胞存活率均>90%，因此选用上述浓度罗氏乳杆菌感染细胞。与PC组比较，5×10～8、10×10～8、50×10～8、100×10～8和200×10～8 CFU·mL^-1罗氏乳杆菌组Caco-2细胞中RV VP6基因拷贝数均明显降低（P<0.01）。与PC组比较，10～7、10～8、10～9和10¹⁰ CFU·mL^-1罗伊氏乳杆菌组Caco-2细胞中病毒滴度均明显降低（P<0.01）。与对照组比较，Ab-NC组、Ab-RV组和Ab-Lac-RV组乳鼠肠道菌群菌落数量均明显减少，乳鼠肠道菌群耗竭成功。灌胃第2和4天，与RV组比较，Ab-RV组乳鼠粪便中RV VP6基因拷贝数明显降低（P<0.05）；灌胃第4、6、8和10天，与Ab-RV组比较，Ab-Lac-RV组乳鼠粪便中RV VP6基因拷贝数明显降低（P<0.05）。与对照组比较，Ab-RV组和Ab-Lac-RV组乳鼠结肠组织中IL-1β、IL-10、IFN-γ及TNF-α mRNA表达水平均明显升高（P<0.05或P<0.01）,IL-8 mRNA表达水平均明显降低（P<0.05）,Ab-Lac-RV组乳鼠结肠组织中IL-10 mRNA表达水平明显升高（P<0.01）。结论：罗伊氏乳杆菌可能通过上调IL-1β、IL-10、IFN-γ和TNF-α mRNA表达及下调IL-8 mRNA表达，抑制RV复制。

目的：探讨小白菊内酯（PTL）通过调控机械敏感性离子通道蛋白1 （Piezo1）表达对机械牵张应力作用下软骨细胞凋亡的影响，并阐明其相关作用机制。方法：按照拉伸性变量将软骨细胞分为0%、5%、10%、15%和20%拉伸组。另取软骨细胞，分为对照组、20%拉伸组、20%拉伸+5μmol·L^-1 PTL组、20%拉伸+10μmol·L^-1 PTL组和20%拉伸+20μmol·L^-1 PTL组。使用Piezo1短发夹RNA （shRNA）干扰慢病毒（sh-Piezo1）或shRNA-NC慢病毒感染软骨细胞，将软骨细胞分为sh-Piezo1组和sh-NC组，另设置空白对照组。另将软骨细胞分为20%拉伸组、20%拉伸+PTL组、20%拉伸+sh-Piezo1组和20%拉伸+sh-Piezo1+PTL组。Hoechst 33258荧光染色观察各组细胞核形态表现，流式细胞术检测各组细胞凋亡率，分光光度法检测各组细胞中含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白酶（Caspase）-3活性，CCK-8法检测各组细胞增殖率，Fluo-4/AM荧光探针法检测各组细胞中钙离子(Ca²⁺)水平，实时荧光定量PCR （RT-qPCR）法检测各组细胞中Piezo1 mRNA表达水平，Western blotting法检测各组细胞中Piezo1蛋白表达水平。结果：Hoechst 33258荧光染色观察，随着拉伸量逐渐增加，0%、5%、10%、15%和20%拉伸组软骨细胞细胞核呈碎块状致密浓染的软骨细胞数量逐渐增加。流式细胞术检测，与0%拉伸组比较，5%、10%、15%和20%拉伸组软骨细胞凋亡率均明显升高（P<0.01）；与对照组比较，20%拉伸组软骨细胞中细胞凋亡率明显升高（P<0.05）；与20%拉伸组比较，20%拉伸+5μmol·L^-1 PTL组、 20%拉伸+10μmol·L^-1 PTL组和20%拉伸+20μmol·L^-1 PTL组软骨细胞细胞凋亡率均明显降低（P<0.05）；与20%拉伸组比较，20%拉伸+PTL组和20%拉伸+sh-Piezo1组软骨细胞凋亡率均明显降低（P<0.05）。分光光度法检测，与0%拉伸组表示，5%、10%、15%和20%拉伸组软骨细胞中Caspase-3活性均明显升高（P<0.01）；与对照组比较，20%拉伸组软骨细胞中Caspase-3活性明显升高（P<0.05）；与20%拉伸组比较，20%拉伸+5μmol·L^-1 PTL组、20%拉伸+10μmol·L^-1 PTL组和20%拉伸+20μmol·L^-1 PTL组软骨细胞中Caspase-3活性均明显降低（P<0.05）；与20%拉伸组比较，20%拉伸+PTL组和20%拉伸+sh-Piezo1组软骨细胞中Caspase-3活性均明显降低（P<0.05）。CCK-8法检测，与0μmol·L^-1 PTL组比较，40.00、 80.00和160.00μmol·L^-1 PTL组软骨细胞增殖率均明显降低（P<0.05），提示20.00μmol·L^-1 PTL为最高无毒性作用浓度。Fluo-4/AM荧光探针法检测，与对照组比较，20%拉伸组软骨细胞中Ca²⁺水平明显升高（P<0.05）；与20%拉伸组比较，20%拉伸+5μmol·L^-1 PTL组、20%拉伸+10μmol·L^-1 PTL组和20%拉伸+20μmol·L^-1 PTL组软骨细胞中Ca²⁺水平均明显降低（P<0.05）；与20%拉伸组比较，20%拉伸+PTL组和20%拉伸+sh-Piezo1组软骨细胞中Ca²⁺水平均明显降低（P<0.05）。RT-qPCR法检测，与空白对照组和sh-NC组比较，sh-Piezo1组软骨细胞中Piezo1 mRNA表达水平明显降低（P<0.05）。Western blotting法检测，与对照组比较，20%拉伸组软骨细胞中Piezo1蛋白表达水平明显升高（P<0.05）；与20%拉伸组比较，20%拉伸+5μmol·L^-1PTL组、20%拉伸+10μmol·L^-1 PTL组和20%拉伸+20μmol·L^-1 PTL组软骨细胞中Piezo1蛋白表达水平均明显降低（P<0.05）；与空白对照组和sh-NC组比较，sh-Piezo1组软骨细胞中Piezo1蛋白表达水平明显降低（P<0.05）。结论：PTL可抑制高强度周期性机械牵张应力诱导的软骨细胞凋亡，其作用机制可能与抑制Piezo1介导Ca²⁺内流引起的细胞凋亡有关。

目的 探讨核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白３（NLRP3）炎性小体在大鼠单侧输尿管梗阻（UUO）模型肾间质纤维化中的作用，并阐明其可能的作用机制。 方法 健康雄性Wistar大鼠30只随机分为假手术组（n=6）和UUO组（n=24），假手术组大鼠仅分离输尿管不结扎，UUO组分别于术后3、7和14 d处死大鼠，并按照处理时间分为UUO 3 d组（n=8）、UUO 7 d组（n=8）和UUO 14 d组（n=8）。HE染色和Masson染色观察各组大鼠肾组织病理形态表现，试剂盒检测各组大鼠肾组织中丙二醛（MDA）水平、超氧化物歧化酶（SOD）活性和羟脯氨酸（HYP）水平，免疫组织化学法检测各组大鼠肾组织中α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）和转化生长因子β1（TGF-β1）蛋白表达水平，Western blotting法检测各组大鼠肾组织中NLRP3蛋白表达水平。 结果 HE染色，UUO组大鼠出现明显肾小管扩张，肾间质水肿和增宽，可见较多炎症细胞浸润，部分肾小管腔内可见脱落的上皮细胞。与假手术组比较，UUO 3 d组、UUO 7 d组和UUO 14 d组大鼠HE染色肾间质纤维化评分均明显升高（P<0.05）；与UUO 3 d组和UUO 7 d组比较，UUO 14 d组大鼠HE染色肾间质纤维化评分明显升高（P<0.05）。Masson染色，UUO组大鼠肾间质炎症细胞浸润明显，可见明显纤维组织增生；随UUO作用时间增加，大鼠部分肾小管消失，肾间质明显增宽，胶原沉积逐渐增多，皮髓交界处胶原沉积程度更加明显。与假手术组比较，UUO 3 d组、UUO 7 d组和UUO 14 d组大鼠Masson染色肾间质纤维化评分均明显升高（P<0.05）；与UUO 3 d组和UUO 7 d组比较，UUO 14 d组大鼠Masson染色肾间质纤维化评分明显升高（P<0.05）。与假手术组比较，UUO 3 d组、UUO 7 d组和UUO 14 d组大鼠梗阻侧肾组织中MDA水平均明显升高（P<0.05），SOD活性明显降低（P<0.05）。与假手术组比较，UUO 3 d组、UUO 7 d组和UUO 14 d组大鼠梗阻侧肾组织中HYP水平均明显升高（P<0.05）；与 UUO 3 d 组比较， UUO 14 d 组大鼠梗阻侧肾组织中 HYP 水平明显升高（P<0.05）。免疫组织化学法，与假手术组比较，UUO 3 d组、UUO 7 d组和UUO 14 d组大鼠肾组织中α-SMA蛋白表达水平明显升高（P<0.05）；与UUO 3 d组和UUO 7 d组比较，UUO 14 d组大鼠肾组织中α-SMA蛋白表达水平均明显升高（P<0.05）；与假手术组比较，UUO 3 d组、UUO 7 d组和UUO 14 d组大鼠肾小管上皮细胞和肾小管间质组织中TGF-β1蛋白表达水平明显升高（P<0.05）；与UUO 3 d组比较，UUO 14 d组大鼠肾小管上皮细胞和肾小管间质组织中TGF-β1蛋白表达水平明显升高（P<0.05）。Western blotting法，与假手术组比较，UUO 7 d组和UUO 14 d组大鼠肾组织中NLRP3蛋白表达水平均明显升高（P<0.05）。 结论 NLRP3炎症小体在UUO大鼠肾纤维化过程中发挥重要作用，其作用机制与氧化应激增加和TGF-β1蛋白表达水平升高有关。

目的 探讨尿石素A（UA）对长时程异氟醚麻醉所致小鼠术后认知功能障碍（POCD）的改善作用，并阐明其可能的作用机制。 方法 24只健康雄性C57BL/6小鼠随机分为空白对照组、麻醉组和UA组，每组8只。UA组小鼠于麻醉前2 d每天腹腔注射200 μL UA溶液，空白对照组和麻醉组小鼠给予等体积生理盐水，麻醉组和UA组小鼠制备长时程异氟醚麻醉模型，空白对照组小鼠不作处理。采用Y迷宫实验检测各组小鼠轮替正确率、移动距离和移动速度，条件恐惧实验检测各组小鼠僵直时间百分率，Western blotting法检测各组小鼠海马组织中白细胞介素（IL）-1β、IL-10和成熟脑源性神经营养因子（mBDNF）蛋白表达水平。 结果 Y迷宫实验，与空白对照组比较，麻醉组小鼠轮替正确率明显降低（P<0.01）；与麻醉组比较，UA组小鼠轮替正确率明显升高（P<0.01）。条件恐惧实验中情境记忆测试，与空白对照组比较，麻醉组小鼠僵直时间百分率明显降低（P<0.01）；与麻醉组比较，UA组小鼠僵直时间百分率明显升高（P<0.05）；线索记忆测试，各组小鼠僵直时间百分率比较差异无统计学意义（P>0.05）。Western blotting法，与空白对照组比较，麻醉组小鼠海马组织中IL-1β蛋白表达水平明显升高（P<0.01），IL-10和mBDNF蛋白表达水平明显降低（P<0.01）；与麻醉组比较，UA组小鼠海马组织中IL-1β蛋白表达水平明显降低（P<0.05），IL-10和mBDNF蛋白表达水平明显升高（P<0.05或P<0.01）。 结论 UA可以改善小鼠的POCD，其作用机制可能与UA的抗炎活性可抑制POCD小鼠的中枢炎症且上调mBDNF蛋白表达有关。