目的：探讨浓缩生长因子（CGF）对骨髓间充质干细胞（BMSCs）膜片性能的影响，并阐明含CGF复合细胞膜片（CS）在骨缺损修复中的作用。方法：体外实验，选取2只3周龄SD大鼠，分离培养获得BMSCs，茜素红和油红O染色鉴定BMSCs成骨和成脂能力。选取3只3周龄SD大鼠，制备CGF液态提取物（CGFe），将细胞分为对照组、传统CS (BMSC-CS)组和含CGF复合CS (CGF/BMSC-CS)组。HE染色观察2组CS形态表现，茜素红和碱性磷酸酶（ALP）染色检测各组CS体外成骨情况，细胞划痕实验检测各组细胞迁移能力，实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法检测各组细胞中ALP、胶原酶Ⅰ型（COL-1）、Runt相关转录因子2 (RUNX2)和骨钙蛋白（OCN） mRNA表达水平。体内实验，选取15只SD大鼠随机分为对照组、BMSC-CS组和CGF/BMSC-CS组，显微计算机断层扫描（Micro-CT）检测各组大鼠颅骨缺损处骨形成参数，HE染色和Masson染色观察各组大鼠颅骨缺损组织形态表现。结果：第3代BMSCs为梭形，排列紧密，呈漩涡团簇状生长；茜素红染色有明显的钙结节生成，油红O染色有红色脂滴形成，证实细胞具有良好的成骨和成脂分化的能力。CS为白色半透明状，边缘轻微卷曲，剥离后的CS卷曲皱缩为不规则状。与BMSC-CS组比较，CGF/BMSC-CS组CS白色更深，透明程度较低，在厚度和延展性方面明显增加，不易破损，有一定黏性和可塑性。HE染色观察，与BMSC-CS组比较，CGF/BMSC-CS组CS细胞数增加，排列密集，细胞外基质（ECM）更丰富，包裹连接细胞形成一个整体的片状结构。茜素红和ALP染色检测，与对照组比较，BMSC-CS组CS的ALP活性和矿化提升值均明显升高（P<0.05）；与对照组和BMSC-CS组比较，CGF/BMSC-CS组CS成骨细胞及红色矿化结节数明显增多，染色明显加深，阳性面积增大，ALP活性和矿化提升值均明显升高（P<0.05）。细胞划痕实验检测，培养24 h，与对照组比较，BMSC-CS组和CGF/BMSC-CS组细胞迁移率均明显升高（P<0.05）；与BMSC-CS组比较，CGF/BMSC-CS组细胞迁移率明显升高（P<0.01）；培养48 h，与对照组比较，CGF/BMSC-CS组细胞迁移率明显升高（P<0.05）。RT-qPCR法检测，与对照组比较，BMSC-CS组细胞中COL-1和OCN mRNA表达水平均明显升高（P<0.01）,CGF/BMSC-CS组细胞中ALP、COL-1、OCN和RUNX2 mRNA表达水平均明显升高（P<0.01）；与BMSC-CS组比较，CGF/BMSC-CS组细胞中ALP、COL-1和OCN mRNA表达水平均明显升高（P<0.01）。Micro-CT检测，对照组大鼠颅骨缺损区域边界清晰，几乎无新骨生成；BMSC-CS组大鼠颅骨仅在骨缺损边缘有少量新骨形成，缺损中心区域有明显空缺；CGF/BMSC-CS组大鼠颅骨新骨沿骨缺损边缘向中心区域生成，修复大部分骨缺损；与对照组比较，BMSC-CS组大鼠颅骨骨体积分数[骨体积（BV）/组织体积（TV）]和骨小梁间距（Tb. N）均明显升高（P<0.05）,CGF/BMSC-CS组大鼠颅骨BV、BV/TV、骨小梁数目（Tb. Th）和Tb. N均明显升高（P<0.05）；与BMSC-CS组比较，CGF/BMSC-CS组大鼠颅骨BV、BV/TV、Tb. Th和Tb. N均明显升高（P<0.01）。HE和Masson染色观察，对照组大鼠颅骨缺损组织几乎无新骨生成，仅见大量胶原纤维连接两侧骨断端；BMSC-CS组大鼠颅骨缺损组织仅在骨缺损边缘有少量新骨形成，中央为致密的胶原纤维与缺损边缘的新生骨连接；CGF/BMSC-CS组大鼠颅骨缺损组织除在骨缺损边缘可以看到新生骨组织外，缺损中央亦有骨岛形成，骨岛周围可见骨细胞及大量的胶原纤维。Masson染色观察，细胞质和类骨质呈红色，胶原呈蓝色；CGF/BMSC-CS组大鼠颅骨缺损组织中可见明显的新形成的类骨质，新骨形成量最高。结论：CGF可以促进BMSCs膜片的成骨分化和ECM的丰富度，含CGF复合CS可以高效修复大鼠颅骨缺损，是一种理想和安全的促骨再生材料。