目的：观察2型糖尿病对大鼠睾丸的损伤作用及灵芝孢子通过PI3K-AKT-mTOR信号通路对其损伤的保护作用。方法：选取40只雄性SD大鼠随机分为正常组(NC)、高脂高糖饮食组(HF)、糖尿病模型组(DM)及灵芝孢子干预组(GLSP),每组10只。通过腹腔注射链脲佐菌素(STZ30mg/kg)联合高脂高糖饮食制备糖尿病大鼠模型，模型制备成功后治疗组使用灵芝孢子300mg/(kg·d)灌胃，其余3组使用同体积生理盐水灌胃，连续12周，期间观测各组大鼠一般情况及状态，每周测定1次大鼠血糖及体质量变化。末次称量体质量及检测空腹血糖后处死大鼠，称量睾丸质量，取附睾尾制涂片染色观察精子形态，试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)水平；Western blotting检测PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT、mTOR、p-mTOR蛋白水平。结果：DM组大鼠较NC组大鼠血糖升高，精神萎靡，SOD水平降低，MDA水平升高，体质量及睾丸质量减轻(P<0.01),精子形态差。灵芝孢子可改善DM大鼠的精神状态及精子形态，降低DM大鼠血糖、MDA水平，升高DM大鼠体质量及睾丸质量(P<0.01)。同时灵芝孢子可使p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT、p-mTOR/mTOR水平降低、SOD水平升高(P<0.05)。结论：灵芝孢子可减轻DM大鼠的睾丸损伤情况，其机制可能与抑制PI3K-AKT-mTOR信号通路有关。