牛病毒性腹泻病毒Real-time PCR检测方法的建立

doi:10.19707/j.cnki.jpa.2019.02.012

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高原农业 ›› 2019, Vol. 3 ›› Issue (02) : 187-192+230. DOI: 10.19707/j.cnki.jpa.2019.02.012

任晨玮, 罗润波, 索朗斯珠

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摘要

根据牛病毒性腹泻病毒(BVDV)5’端非编码区(5'UTR)的核苷酸序列,设计特异性扩增引物,建立BVDV的实时荧光定量PCR检测方法。建立的方法只能检测到BVDV,与猪瘟病毒等没有交叉反应,具有高度特异性;在10～1～10～8copies/μL模板范围内具有良好的线性关系,所制作的标准曲线相关系数为0.993,最低可检测到3.0×10～4个拷贝数的病毒核酸,其敏感性为普通PCR的100倍,具有灵敏度高的特点;不同情况下3次重复实验,变异系数小于2.8%,具有重复性好的特点。本研究建立的BVDV荧光定量PCR检测方法可以用于牛病毒性腹泻病变的早期诊断和病毒鉴定。