目的：通过网络药理学方法与细胞实验技术，旨在深入探讨桔梗皂苷D抗鼻咽癌方面的作用机制。方法：通过Pubchem、PharmMapper、GeneCards数据库获取桔梗皂苷D及鼻咽癌对应靶点并取交集后输入DAVID数据库中进行GO和KEGG富集分析，通过STRING数据库和Cytoscape软件获取交集靶点蛋白互作网络（PPI）、“桔梗皂苷D—靶点—鼻咽癌—通路”网络模型，筛选获得相关信号通路及核心靶点，对排名前5的核心靶点和桔梗皂苷D进行分子对接。利用CCK-8法、平板克隆实验、伤口愈合实验、Calcein-AM/PI染色分别评估桔梗皂苷D对鼻咽癌细胞增值、克隆形成、迁移和凋亡的影响，western blotting检测MAPK/ERK通路相关蛋白表达水平。结果：网络药理学分析获得潜在治疗靶点115个，GO、KEGG富集分析获得生物过程309个、细胞组分44个、和分子功能83个，信号通路125个，综合PPI、“药物—靶点—鼻咽癌—通路”网络模型以及KEGG富集结果筛选获得MAPK1、HRAS、GRB2、MAPK8、MAPK10等10个核心靶点，其中MAPK1度值最高。分子对接结果显示，桔梗皂苷D与核心靶点有较好的结合活性。细胞实验结果显示，桔梗皂苷D可显著抑制鼻咽癌细胞的增殖、迁移及克隆形成能力，诱导凋亡，下调p-ERK蛋白表达（均P<0.05）。结论：桔梗皂苷D可能通过降低p-ERK蛋白的表达，进而抑制MAPK/ERK信号通路的激活，从而发挥抗鼻咽癌的作用。