目的：评估鸡源性H6N2亚型禽流感病毒在MDCK、A549和离体人肺中的复制效率，探讨该病毒跨种间屏障感染人的潜能。方法：选取2株鸡源性H6N2禽流感病毒A/CK/HZ/260/2017、A/CK/DG/651/2019，基因测序并分析该2株病毒全基因组的核苷酸同源性及遗传进化，固相直接结合法分析分析病毒的受体结合特异性，应用MDCK、A549和人肺组织评估病毒的复制。结果：鸡源性H6N2病毒基因来源于欧亚谱系，HA、NA均属于GD-SZBJ-like分支，内部基因主要由两个H6N2病毒进化分支的重配进化而来，包括GD-SZBJ-like分支和G1291-like分支，属低致病性禽流感病毒，仅结合禽型受体SAα-2,3Gal,HA的受体结合域未发现向有利于结合人型受体突变。病毒均可在MDCK和A549细胞中复制，离体人肺组织病毒分离培养阳性，免疫组化检测病毒抗原显示，A/CK/HZ/260/2017病毒株在人肺组织和部分细支气管出现流感病毒核蛋白阳性，A/CK/DG/651/2019病毒株在在人肺组织出现流感病毒核蛋白阳性。结论：鸡源性H6N2亚型禽流感病毒仍属低致病性禽流感病毒，仅识别与结合禽型受体，但病毒可不经适应直接在哺乳动物和人下呼吸道进行有效复制，提示鸡源性H6N2禽流感病毒具有跨种属感染人的潜能。