目的 建立温肾暖脾颗粒补骨脂素、异补骨脂素的含量测定方法，为质量控制提供实验依据。方法 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：甲醇-水（40:60）；检测波长246 nm；结果 峰面积和质量浓度之间线性关系良好，补骨脂素R²=0.999 2，异补骨脂素R²=0.999 3；精密度、稳定性均符合要求；补骨脂素平均回收率为98.25%,RSD为0.89%，异补骨脂素平均回收率为95.90%,RSD为1.18%。结论 本试验研究并建立了高效液相色谱（high performance liquid chromatography, HPLC）补骨脂素、异补骨脂素的含量测定方法，可以作为温肾暖脾颗粒质量控制的依据。