目的：采用孟德尔随机化（MR）方法研究一碳代谢相关维生素B含量与食管癌（EC）发生之间的因果关联。方法：分别以血清中一碳代谢相关维生素B含量和食管癌为暴露因素和结局变量，选择与维生素B₆、B₉和B₁₂含量显著相关的单核苷酸多态性（SNPs）作为工具变量（IVs）,进行两者因果关联的MR分析。采用Cochran's Q检验进行异质性分析，采用MR-Egger回归法和MR-PRESSO检验水平多效性，留一法检验结果的稳健性。结果：维生素B₆、B₉和B₁₂分别有24个、18个、25个SNPs纳入为IVs。逆方差加权优势比（OR）值分别为1.001、0.972、1.000（均P>0.017）。Cochran's Q检验均显示不存在异质性（均P>0.05）。MR-Egger回归法和MR-PRESSO检验均未发现水平多效性（均P>0.05）。留一法敏感性分析提示所得结果稳健。结论：一碳代谢相关维生素B含量与食管癌发病之间不存在直接因果关系。