等温快速检测HAdV-11/55型方法的建立与评价

周华君, 吴晓虹, 赵治友, 车飞虎, 孙青阳, 成军, 戴玉柱

蚌埠医科大学学报 ›› 2025, Vol. 50 ›› Issue (02) : 234-238. DOI: 10.13898/j.cnki.issn.2097-5252.2025.02.021

等温快速检测HAdV-11/55型方法的建立与评价

  • 周华君, 吴晓虹, 赵治友, 车飞虎, 孙青阳, 成军, 戴玉柱
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摘要

目的:将重组酶介导等温扩增技术(RAA)和实时荧光探针相结合拟开发一种简易、快速的人腺病毒(HAdV)-11/55检测方法。方法:以HAdV-11/55的Hexon基因作为靶序列设计合成多对引物和探针,选择最佳引物探针组合,在39℃、40℃、42℃条件下进行重组酶介导等温扩增,选出最佳反应温度,并评估该方法的灵敏度和特异性。结果:实验表明该方法的最适温度为42℃,最低检测限为10~1 copies/μL。特异性检测结果显示,该实时荧光RAA检测方法可以检测HAdV-11/55,且不与其他亚型和其他呼吸道病原体发生交叉反应,特异性良好,该方法所得结果与实时荧光PCR检测结果一致性为100%,具有良好的检测性能。结论:本研究开发的实时荧光RAA检测方法可以在仅有简单恒温设备的条件下20 min内完成检测,是一种检测HAdV-11/55快速且简易的方法,适用于HAdV-11/55的床旁分子诊断检测。

关键词

人腺病毒 / 实时荧光探针 / 重组酶介导等温扩增技术

中图分类号

R446.5

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周华君, 吴晓虹, 赵治友, 车飞虎, 孙青阳, 成军, 戴玉柱. 等温快速检测HAdV-11/55型方法的建立与评价. 蚌埠医科大学学报. 2025, 50(02): 234-238 https://doi.org/10.13898/j.cnki.issn.2097-5252.2025.02.021

基金

浙江省杭州市医药卫生科技规划项目(OO20190415); 浙江省医药卫生科技规划项目(2019331539); 浙江省自然科学基金项目(LGF20H200009)

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