目的 探究急性化脓性中耳炎患儿耳分泌物的病原菌分布情况及药敏结果。方法 选取2018年1月—2023年5月武汉儿童医院接诊的76例急性化脓性中耳炎患儿，采集中耳分泌物行病原学培养及药敏试验检测，分析致病菌分布特征及药敏结果，并分析主要感染菌种的耐药性变迁结局。结果 76例患儿共检出病原菌84株，肺炎链球菌和金黄色葡萄球菌的占比较高，分别为71.43%和23.81%。1个月～1岁、> 1～3岁、>3～8岁患儿肺炎链球菌感染率分别为40.00%、35.00%和25.00%，金黄色葡萄球菌感染率分别为25.00%、30.00%和45.00%。肺炎链球菌对左旋氧氟沙星的耐药性2018～2019年低于2022～2023年（P <0.05）。肺炎链球菌对阿奇霉素、四环素和克林霉素的耐药性较高，分别为81.67%(49/60)、90.00%(54/60)和66.67%(40/60)；对万古霉素和利奈唑胺的敏感性最高，耐药率均为0.00%；对氯霉素、厄他培南和奎奴普丁/达福普汀的耐药性较低，分别为8.33%(5/60)、13.33%(8/60)和10.00%(6/60)；对左旋氧氟沙星、美罗培南、复方新诺明、头孢噻肟、头孢曲松、头孢吡肟和青霉素均存在不同程度的耐药性，耐药率为21.67%～48.33%。金黄色葡萄球菌对左旋氧氟沙星、头孢吡肟、阿奇霉素、四环素和克林霉素的耐药性较高，分别为70.00%(14/20)、65.00%(13/20)、65.00%(13/20)、90.00%(18/20)和70.00%(14/20)；对万古霉素、利奈唑胺的敏感性最高，耐药率均为0.00%；对氯霉素和奎奴普丁/达福普汀的耐药性较低，均为5.00%(1/20)；对美罗培南、复方新诺明、头孢噻肟、头孢曲松、青霉素和厄他培南均存在不同程度的耐药性，耐药率为20.00%～50.00%。结论 急性化脓性中耳炎患儿的病原菌分布中以肺炎链球菌和金黄色葡萄球菌占比最高，药敏试验得出两者对阿奇霉素、四环素及克林霉素的耐药性偏高，而对氯霉素、万古霉素、利奈唑胺、厄他培南及奎奴普丁/达福普汀的耐药性相对较低。