目的 研究临床上耐利奈唑胺粪肠球菌(LREf)携带的optrA基因通过质粒介导在粪肠球菌间的水平转移机制。方法 收集昆明市某三级甲等医院2022年8月—2023年8月留取的非重复LREf,使用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)仪进行鉴定，VITEK 2 Compact、纸片扩散法、微量肉汤稀释法进行药敏试验，聚合酶链式反应(PCR)检测optrA基因，全基因组测序(WGS)分析LREf的分子生物学特征，以LREf为供体菌、临床来源粪肠球菌为受体菌进行接合实验。结果 共收集17株LREf, 12株LREf的质粒检测出optrA基因，检测出多种耐药基因及毒力基因。12株LREf菌株以ST16 (50.0%)为主要分型。接合试验的24株接合子中有8株接合成功，接合率为33.3%,进一步分析发现，菌株接合前后位于质粒上的optrA基因上下游均存在IS1216E插入序列，且形成IS1216E-fexA-optrA-erm(A)-IS1216E样的转座单元。结论 optrA基因可通过同时携带erm(A)、fexA基因的质粒介导在临床粪肠球菌间进行水平转移，而插入序列IS1216E在其水平转移过程中发挥着重要作用。