目的 探讨多重耐药鲍曼不动杆菌(MDR-AB)对替加环素不敏感的耐药机制，为临床合理用药及医院感染防控提供参考。方法 收集2022年4月—2023年5月广州医科大学附属第一医院临床分离的替加环素不敏感MDR-AB(TIS-MDR-AB)及替加环素敏感MDR-AB(TS-MDR-AB)各22株。应用外排泵抑制剂羰基氰化物间氯苯腙(CCCP)进行外排泵表型抑制试验，采用聚合酶链式反应(PCR)技术对主要外排泵基因(adeB、adeG、adeJ)和替加环素耐药基因tet(X)进行筛选，并应用实时荧光定量PCR检测其mRNA表达水平；Sanger测序分析外排泵调控基因adeRS的突变。结果 两组MDR-AB外排泵基因adeB、adeG、adeJ的检出率均>95%,未检测到tet(X)基因。外排泵抑制剂试验显示，TIS-MDR-AB菌株在加入CCCP后最低抑菌浓度(MIC)下降，且有3株菌株外排泵表型阳性。TIS-MDR-AB组MDR-AB adeB的mRNA表达水平高于TS-MDR-AB组(P<0.01),adeG和adeJ基因的表达差异无统计学意义。adeR基因和adeS基因中发现多个突变，且有2株菌株adeS基因中插入ISAba1,3株菌株插入ISAba13。结论 外排泵系统adeABC过度表达可能在MDR-AB对替加环素敏感性下降机制中起重要作用，且其过度表达可能与外排泵调控基因adeRS中出现插入序列或突变有关。