目的 追踪评价连续三年推进“提高抗菌药物治疗前病原学送检率”专项行动的改进效果，为今后工作提供循证依据。方法 收集2020—2023年某三级综合医院住院患者临床资料，以2020年基线调查结果为改进前组，2021—2023年持续推进专项行动改进目标为改进后组，采取完善信息系统、建立多部门协作机制、全员多层次培训宣教、规范医疗行为和病原学送检流程、强化监管效能等措施，动态追踪指标并及时跟进策略，通过医院感染信息系统开展监测并获取数据。应用R 4.1.3统计软件，比较两组指标的差异和不同年份数据变化趋势以评价改进成效。结果 推进专项行动改进目标三年，治疗性抗菌药物使用率有所降低，且随年份变化呈下降趋势(P<0.001)。抗菌药物治疗前病原学送检率由39.38%提高到85.40%,血培养送检率由14.11%提高到49.28%,限制级和特殊级抗菌药物治疗前病原学送检率分别由31.76%、55.97%增至92.11%、99.10%,联合使用重点药物前病原学送检率由83.09%增至97.74%,且均随着年份变化呈逐年增高趋势(均P<0.001)。多重耐药菌检出率下降，耐碳青霉烯类肠杆菌目细菌(CRE)和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)检出率呈下降趋势(P<0.001)。医院感染诊断相关病原学送检率保持在90%以上，采集标本与感染部位相符率由73.26%提高到91.67%,且随着年份变化呈逐年增高趋势(P<0.05),其中内科科室相符率最低，重症医学科相符率最高。结论 连续三年持续推进专项行动改进目标，保持动态评估，大大提高了临床医务人员对病原学标本送检指征和时机的准确把握，规范了诊疗行为，从而引导临床正确、合理使用抗菌药物，减少医院细菌耐药的发生。