目的 了解医务人员佩戴医用防护口罩的行为现状，并分析未能规范佩戴医用防护口罩的影响因素，为改进口罩佩戴相关培训提供依据。方法 2022年6月—2023年3月，选取某三级甲等医院的工作人员为研究对象，采用气溶胶凝结核计数法对市面上常见的5款医用防护口罩进行实时定量适合性测试，通过测试仪器适合因数的变化、是否需要专业人员辅助调整综合判断医用防护口罩佩戴情况，应用自制的一般资料调查表对参与者进行问卷调查，借助三维(3D)激光扫描技术扫描参与者头面部，将扫描图像导入Geomagic Studio 2013软件测量头面部尺寸。结果 共调查222名医务人员，完成991次实时测试，208次3D扫描。其中221次(22.30%)测试参与者未能规范佩戴医用防护口罩，5款医用防护口罩的不规范佩戴比率分别为30.56%、25.62%、25.87%、23.15%、7.35%。佩戴口罩不规范率：不同医用防护口罩形状，参与者职业、上一次医用防护口罩佩戴技能培训时间及是否有呼吸道传染病防治相关工作经验各组比较，差异均有统计学意义(均P<0.05);医用防护口罩品牌、尺寸，以及参与者性别、科室等各组比较，差异无统计学意义(均P>0.05)。折叠状医用防护口罩佩戴规范与不规范者身体质量指数(BMI)比较，差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 医务人员佩戴医用防护口罩不规范受诸多因素影响，在正式的定量适合性测试之前推荐进行实时测试，能节省时间，提高测试效率。未来进行医用防护口罩佩戴培训时，对不同形状的口罩应进行针对性的培训，重点关注后勤人员、实习生、BMI高者，以及从未接受医用防护口罩佩戴培训者及未参加过呼吸道传染病防治相关工作者。