目的 了解新生儿重症监护病房(NICU)医院感染病原菌谱及变迁情况。方法 收集2018年1月—2022年12月某院NICU发生医院感染新生儿的临床病历资料，回顾性分析医院感染的病原菌谱情况。结果 共调查7 597例住院新生儿，240例发生医院感染，共263例次，医院感染发病率为3.16%,例次发病率为3.46%。其中血流感染96例(36.50%),呼吸系统感染70例(26.62%),感染部位不明确者57例(21.67%)。送检标本中共检出病原菌170株，其中革兰阳性菌78株(45.88%),以葡萄球菌属占比最高；革兰阴性菌78株(45.88%),以肺炎克雷伯菌为主；真菌14株(8.24%)。2018—2022年革兰阴性菌检出比率呈上升趋势(P<0.01)。结论 NICU医院感染以血流感染居多。近几年革兰阴性菌检出率逐年上升，临床应加强医院感染的预防与控制。