目的 探讨结核感染T细胞斑点试验(T-SPOT.TB)在脊柱结核(STB)鉴别诊断中的效能，并通过受试者工作特征(ROC)曲线最佳截断值优化诊断效能。方法 收集2010年1月—2019年5月某院脊柱感染患者的临床资料，包括术前T-SPOT.TB检测结果、白细胞计数、C-反应蛋白、血沉、降钙素原和结核抗体等相关数据，根据诊断标准进行临床诊断，分析T-SPOT.TB在术前诊断STB与其他脊柱感染中的灵敏度和特异度，评价优化后的T-SPOT.TB指标的诊断效能。结果 共纳入132例患者，其中78例(59.09%)为STB,54例(40.91%)为非结核脊柱感染。T-SPOT.TB在鉴别诊断STB方面的灵敏度为67.68%,特异度为66.67%。单因素logistic回归分析显示，与非结核脊柱感染比较，T-SPOT.TB检测诊断STB的OR值为4.188(95%CI:1.847～9.974,P<0.001)。优化T-SPOT.TB评价指标，通过绘制ROC曲线，确定ESAT-6、CFP-10、CFP-10+ESAT-6在STB和非结核脊柱感染鉴别诊断中的最佳截断值，分别为12.5、19.5、36,曲线下面积(AUC)分别是0.765 6、0.741 5、0.778 6,均具有较好的诊断性能，其中以CFP-10+ESAT-6的AUC最高。CFP-10+ESAT-6特异性斑点数在脊柱结核诊断中性能更佳，其诊断准确度为75.56%,较优化前T-SPOT.TB的67.42%高。结论 T-SPOT.TB检测在区分STB与非结核脊柱感染方面显示出较高的诊断效能，T-SPOT.TB检测呈阳性，尤其是当CFP-10+ESAT-6的斑点数超过36时，提示脊柱结核的可能性较大。