目的 调查学龄前孤独症谱系障碍（autism spectrum disorder, ASD）儿童血清叶酸和维生素B₁₂(vitamin B₁₂, VB₁₂)水平及其与神经发育水平的关联。方法 招募324例2～6岁ASD儿童和318例2～6岁健康儿童，采用化学发光免疫分析法测定血清叶酸和VB₁₂水平，采用社交反应量表和儿童孤独症评定量表评估ASD儿童的核心症状，采用格塞尔发育量表评估神经发育水平。结果 ASD儿童的血清叶酸及VB₁₂水平均显著低于健康儿童（P<0.05）。ASD儿童血清叶酸水平与大运动和精细运动发育商呈正相关（P<0.05），血清VB₁₂水平与适应性行为、精细运动、语言发育商呈正相关（P<0.05）。2～<4岁ASD儿童血清叶酸水平与各能区发育商均呈正相关（P<0.05），血清VB₁₂水平与语言发育商呈正相关（P<0.05）;ASD男童血清VB₁₂水平与语言、个人-社会发育商呈正相关（P<0.05）。结论 学龄前ASD儿童血清叶酸和VB₁₂水平较健康儿童低，且与神经发育水平相关，尤其<4岁ASD儿童。因此，保持正常的血清叶酸和VB₁₂水平可能有益于ASD儿童，特别是<4岁ASD儿童的神经发育。[中国当代儿科杂志，2024,26（4）:371-377]