目的 分析3种苯丙氨酸羟化酶(phenylalanine hydroxylase, PAH)突变体(p.R243Q、p.R241C和p.Y356X)的体外表达，确定3种突变体的致病性。方法 利用生物信息学技术预测PAH突变体对PAH蛋白结构和功能的影响。构建相应的PAH突变型质粒，在人胚胎肾细胞HEK293T中进行表达，采用定量逆转录聚合酶链反应检测3种PAH突变体的mRNA表达水平，利用蛋白质印迹法与酶联免疫吸附试验检测突变体的PAH蛋白表达水平。结果 生物信息学分析预测结果显示，3种突变体均具备致病性。突变体p.R243Q和p.R241C质粒在HEK293T细胞中的mRNA表达水平与野生型类似(P>0.05)，而p.Y356X突变体质粒的mRNA表达水平明显下降(P<0.05)。3种突变体PAH蛋白的表达水平与野生型相比均显著降低(P<0.05)。p.R241C和p.Y356X的细胞外PAH蛋白浓度较野生型降低(P<0.05),p.R243Q与野生型相比差异无统计学意义(P>0.05)。结论 p.R243Q、p.R241C和p.Y356X降低真核细胞中PAH蛋白的表达量，其中p.R241C和p.Y356X还影响PAH蛋白的功能，这3种PAH突变体均为致病性突变。[中国当代儿科杂志，2024,26 (2):188-193]