[目的]探究中药活性成分茜草素对鸭肠炎病毒（DEV）体外复制的抑制作用，缓解当前养殖业中DEV引发的高死亡率、抗生素滥用及耐药性等问题，提供安全、天然的“替抗”候选药物。[方法]试验通过设空白对照组（A组）、茜草素对照组（B组）、DEV感染组（D组）和茜草素干预组（E组）分别处理鸭胚成纤维细胞（DEF）后，测定DEV的半数组织细胞感染剂量(TCID₅₀)，利用CCK-8法确定茜草素的最大安全浓度（TC₀），并通过细胞病变观察（CPE）和荧光定量PCR（q-PCR）技术分析茜草素对DEV增殖的抑制作用。[结果]DEV-GZ贵州分离株TCID₅₀为3.98×10^-5/0.1 mL；茜草素TC₀为0.05 mg/mL；空白对照组和茜草素对照组无细胞病变（CPE），而DEV感染组细胞出现皱缩变圆、脱落等CPE现象，茜草素干预组细胞病变程度较DEV感染组轻；空白对照组和茜草素对照组未检测出DEV，而DEV感染组病毒相对表达量高，茜草素干预组病毒相对表达量低。[结论]茜草素可减轻DEV引起的细胞病变并抑制病毒增殖，具有抗DEV潜力。