基于高效液相色谱法和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼、2,2′-联氮-双-（3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸）二铵盐、铁离子还原/抗氧化能力法，用于同时测定黄毛耳草不同部位中东莨菪内酯、芦丁、山奈酚-3-O-芸香糖苷及总香豆素、总黄酮质量分数，并评价不同部位的抗氧化活性.结果表明，黄毛耳草不同部位中东莨菪内酯、芦丁、山奈酚-3-O-芸香糖苷3个成分及总香豆素、总黄酮的质量分数在叶部最高，全草中次之，茎中最低；抗氧化能力为叶>全草>茎.方法简便易行，结果准确且重复性好，适用于黄毛耳草不同部位的成分定量分析及药理活性评价.