目的:了解临床尿液标本中粪肠球菌耐药与毒力基因的分布及其与临床常用抗菌药物耐药性的关系。方法:收集2019年1月～2022年4月上海市奉贤区中心医院非重复分离临床尿液标本中的粪肠球菌110株，PCR法筛查4种毒力基因（ace、cylA、gelE、fsrB）和5种耐药基因[optrA、tetM、ermB、bla_TEM、ant（6）-I],并分析毒力及耐药基因携带情况与细菌耐药性的关系。结果:110株粪肠球菌分离株主要来自泌尿外科（32/110,29.09%）;粪肠球菌临床分离株对多种抗菌药物耐药，其中对四环素的耐药率最高（94/110,85.45%）,所有分离株对万古霉素敏感。分离株中tetM检出率最高（97/110,88.18%）,tetM、optrA、ermB、ant（6）-I阳性菌株分别对四环素、利奈唑胺、红霉素、庆大霉素的耐药率高于对应的阴性菌株（P<0.05）。分离株中ace的检出率最高（97/110,88.18%）,其余毒力基因的检出率均高于60%,毒力基因总检出率高达99.09%。结论:本研究尿液分离的粪肠球菌的部分耐药表型主要由相关耐药基因介导，菌株携带毒力基因与细菌的耐药表型密切相关。需要加强细菌耐药监测并采取措施预防控制感染，降低院内耐药菌株与高毒力菌株的传播。