基于绿色分析化学理念，设计了液液微萃取-高效液相色谱（HPLC）法测定水中磺胺类药物的实验并应用于本科实践教学。实验中采用较少的萃取溶剂对样品进行前处理，色谱分离时选用乙醇作为绿色有机流动相，通过优化萃取和分离条件，建立了一种液液微萃取-高效液相色谱联用分析水样中磺胺类药物（磺胺胍（SG）、磺胺嘧啶（SD）、磺胺间二甲氧嘧啶（SDM）、磺胺甲噁唑（SMZ）和酞磺胺噻唑（PST））及其常用配伍药甲氧苄啶（TMP）的新方法。其结果表明测定各药物的线性范围分别为10～1 000μg/L(SG、SD、SDM及SMZ)、100～1 000μg/L(TMP)和50～1 000μg/L(PST)，检测限在50～100 ng/L(S/N=3)之间。对湖水样品进行测定，加样回收率在93.6%～105.2%之间。该实验立足于分析化学前沿且难易适中，可以作为化学、药学和环境等专业高年级本科生的研究性实验，有利于学生提高创新能力、低碳意识及综合素质。