为明确引起槟榔叶斑病的病原菌及其生物学特性，从海南省万宁市龙滚镇黄竹塘村附近槟榔（Areca catechu Linnaeus）种植基地采集的病害标本上通过组织分离法对病原菌进行分离，病原菌纯化后测定其致病性，通过形态特征和多基因（ITS、TEF1、CAL、HIS和TUB）的系统发育分析对病原菌进行鉴定，并研究了该病原菌在不同培养条件下的生物学特性。结果表明，引起该槟榔叶斑病的病原菌为云南间座壳菌（Diaporthe yunnanensis），其最适生长条件为马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）培养基、28℃和pH为6，且光照条件有利于其生长。研究结果可为进一步的病原菌致病机理、室内药剂筛选和防控技术研究提供理论基础。