分别采用正丁醇萃取法和大孔树脂吸附法对粗茶皂素进行纯化处理研究后，探讨了纯化处理对磁性固定化酶分离茶皂素中乙醇脱氢酶活性组分（AAC）的影响。结果显示，纯化后样品中多糖和多酚类物质有所减少，茶皂素的含量明显提高，其中萃取法和大孔树脂吸附法纯化样品中茶皂素含量分别较粗茶皂素提高19.8%和18.5%。将纯化样品应用于AAC的磁性固定化酶分离时，固定化酶的酶活力损失率可以得到有效降低，其中以大孔树脂吸附法的损失率最低，可达27.8%。纯化前后获得的AAC的光谱学特征没有改变，主要仍为茶皂苷类物质。AAC对乙醇脱氢酶的作用未明显改变，均有抑制作用且抑制效果呈浓度依赖性。因此，对粗茶皂素进行纯化处理可降低磁性固定化酶分离过程中酶的用量，提高固定化酶的重复利用性，而对AAC的影响不明显。