青稞禾生指葡孢霉(Dactylobotrys gramincola)LAMP快速检测方法的建立及应用

张海青, 杜春梅, 董瑞芳, 姚强

麦类作物学报 ›› 2025, Vol. 45 ›› Issue (07) : 993-1000.

青稞禾生指葡孢霉(Dactylobotrys gramincola)LAMP快速检测方法的建立及应用

  • 张海青, 杜春梅, 董瑞芳, 姚强
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摘要

青稞鞘腐病是由禾生指葡孢霉(Dactylobotrys gramincola)引起的穗部病害,严重影响青稞的产量和品质。本研究基于环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplification, LAMP),以D.gramincola的ITS序列为基础,设计并筛选出1组特异性引物,通过优化反应温度,建立了灵敏度高且可快速检测青稞D.gramincola的LAMP检测方法。进一步对该方法的特异性和灵敏度进行评估,并对田间疑似发病植株的茎、旗叶、穗组织进行检测。结果表明,该LAMP检测体系在64℃下反应70 min即可从6种青稞病原菌中有效检测D.graminicola,检测灵敏度达13.07 fg·μL-1,比常规PCR技术灵敏度高100倍。对田间疑似发病植株组织进行检测,穗部检出10份阳性样本,旗叶检出8份阳性样本,茎秆部位未检出,检出率为50%。该方法能够特异性检测青稞发病组织中的D.graminicola,为青稞鞘腐病的田间快速诊断及病原菌检测提供了新方法。

关键词

青稞 / 禾生指葡孢霉 / 环介导等温扩增 / 田间快速检测

中图分类号

S435.123

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张海青, 杜春梅, 董瑞芳, 姚强. 青稞禾生指葡孢霉(Dactylobotrys gramincola)LAMP快速检测方法的建立及应用. 麦类作物学报. 2025, 45(07): 993-1000

基金

青海省科技计划-杰出青年基金项目(2023-ZJ-944J)

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