HPV18间隔序列介导真核基因以双顺反子形式表达

张煜豪, 孙小强, 鲍正好, 李雨彤, 刘佳艺, 何红鹏

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天津科技大学学报 ›› 2024, Vol. 39 ›› Issue (04) : 9-14+25. DOI: 10.13364/j.issn.1672-6510.20230167

HPV18间隔序列介导真核基因以双顺反子形式表达

  • 张煜豪, 孙小强, 鲍正好, 李雨彤, 刘佳艺, 何红鹏
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摘要

HPV18是一种DNA病毒,其E6和E7基因可读框(ORF)相隔8个核苷酸,以双顺反子形式在宫颈癌细胞HeLa细胞中表达E6和E7蛋白。为探究此间隔序列是否在基因双顺反子表达中发挥关键作用,利用此序列构建2个双顺反子表达质粒,转染人胚胎肾细胞HEK293T细胞,检测上下游2个ORF表达水平。逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)结果显示2个ORF同时转录,免疫印迹(Westernblot)结果显示2个蛋白同时表达,荧光显微镜结果进一步显示红色荧光蛋白(RFP)和绿色荧光蛋白(GFP)共表达。以上结果证明HPV18E6和E7基因间隔序列可在上游ORF翻译结束后重新启动下游ORF翻译。此现象在真核细胞中比较罕见,分子机制可能与核糖体重新结合有关,值得进一步探究。

关键词

翻译起始 / 多顺反子 / HPV / 基因表达 / 核糖体结合序列 / 真核细胞

中图分类号

Q811.4

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张煜豪, 孙小强, 鲍正好, 李雨彤, 刘佳艺, 何红鹏. HPV18间隔序列介导真核基因以双顺反子形式表达. 天津科技大学学报. 2024, 39(04): 9-14+25 https://doi.org/10.13364/j.issn.1672-6510.20230167

基金

国家重点研发计划资助项目(2018YFA0901702); 天津市级大学生创新创业训练计划资助项目(202310057267)

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