矛尾复鰕虎鱼（Synechogobius hasta）为重要的海水经济鱼类，随着其自然资源量显著减少，亟待发展人工增养殖。染色体是遗传信息的载体，对染色体的研究是经济动物人工繁育工作的基础，目前矛尾复鰕虎鱼染色体核型特征尚未有明确结论。研究以矛尾复鰕虎鱼成体头肾为材料，经秋水仙素处理后，采用低渗和滴片常规方法制备染色体标本，并进行核型分析。结果表明，矛尾复鰕虎鱼成体经胸腔注射3μg/g（鱼体质量）的0.5 g/L秋水仙素，3 h后取头肾，采用0.075 mol/L KCl低渗30 min，热滴片法制片效果最佳。矛尾复鰕虎鱼染色体数目为2N=44，核型公式为2N=2M+2ST+40T，染色体臂数NF=48，未发现异形性染色体和随体。研究结果可为鱼类进化、种质鉴定及遗传育种提供基础资料。