CD19-CAR慢病毒生产方法的比较分析与优化

詹思建, 张帆, 段海潇, 汪洋, 胡翰, 刘滨磊

湖北工业大学学报 ›› 2025, Vol. 40 ›› Issue (01) : 65-69.

CD19-CAR慢病毒生产方法的比较分析与优化

  • 詹思建, 张帆, 段海潇, 汪洋, 胡翰, 刘滨磊
作者信息 +
History +

摘要

为优化CD19-CAR慢病毒的生产方法,以获得更优的生产条件,采用慢病毒三质粒包装系统(pLVX,psPAX2,pMD2.G),并利用转染试剂(lipo8000TM,Lipofectamine? 3000,PEIpro?)进行慢病毒的包装,通过超速离心和超滤技术对慢病毒进行浓缩。并利用流式细胞仪测定慢病毒滴度。研究发现,使用Lipofectamine? 3000转染试剂包装的慢病毒原液滴度最高;在pLVX、psPAX2与pMD2.G质量比为4∶3∶1,质粒总量为5μg,质粒总量(m/μg)与转染试剂体积比(V/μL)为1∶5时,慢病毒的滴度达到最高。此外,使用超滤方法浓缩的慢病毒滴度高于超速离心法。尽管使用Lipofectamine? 3000包装慢病毒原液滴度最高,但考虑到扩大生产的成本,选择性价比更高的PEIpro?更为适宜。因此,本研究得出的最佳慢病毒生产方法是:使用转染试剂PEIpro?包装慢病毒,在pLVX、psPAX2与pMD2质量比为4∶3∶1,质粒总量为5μg,质粒总量(m/μg)与转染试剂体积比(V/μL)为1∶5,收集48 h和72 h的病毒上清液,并通过超滤方法对慢病毒进行浓缩。

关键词

慢病毒 / 病毒包装 / 病毒浓缩 / 滴度

中图分类号

Q81

引用本文

导出引用
詹思建, 张帆, 段海潇, 汪洋, 胡翰, 刘滨磊. CD19-CAR慢病毒生产方法的比较分析与优化. 湖北工业大学学报. 2025, 40(01): 65-69

评论

Accesses

Citation

Detail

段落导航
相关文章

/