对绵羊颗粒细胞进行体外培养、冷冻复苏。采集西藏绵羊卵巢,用注射器抽吸卵泡中的卵泡液,经低速离心分离沉淀得到卵泡内的颗粒细胞,用于体外培养。结果显示:原代培养时,颗粒细胞形成单层需要6～7d,形状多为梭形或不规则三角形,呈放射状;传代颗粒细胞生长速度较快,接种后第二天细胞就开始贴壁,第6d左右长满平皿底,形成颗粒细胞单层,多呈流线型。当传至第3代培养后,即可获得纯化的颗粒细胞;冻存的细胞经复苏后仍保持其正常的结构和功能。细胞生长曲线呈"S"形,符合贴壁细胞的生长特征。可见,所建立的西藏绵羊颗粒细胞分离方法和保存方法可行有效,这能为西藏绵羊的体细胞克隆提供供体细胞,也能为建立西藏绵羊遗传资源体细胞库等研究奠定基础。