产L-阿拉伯糖异构酶基因工程菌的构建及优化

张艳芳, 王晓茹, 张一帆, 张春枝

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大连工业大学学报 ›› 2024, Vol. 43 ›› Issue (04) : 257-260. DOI: 10.19670/j.cnki.dlgydxxb.2024.0404

产L-阿拉伯糖异构酶基因工程菌的构建及优化

  • 张艳芳, 王晓茹, 张一帆, 张春枝
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摘要

L-阿拉伯糖异构酶(L-AI)可专一性的作用于底物D-半乳糖,生成D-塔格糖。为获得高产L-AI的菌株,将来源于短乳杆菌L.brevis sp. D-tag 1的L-AI编码基因araA基因连接到pET-30a(+)表达质粒中构建重组质粒,并将重组质粒通过热激法转入E.coli BL21(DE3),构建得到基因工程菌E.coli BL21(DE3)/pET-30a(+)-araA。根据宿主大肠杆菌的密码子偏好性,对araA基因进行密码子优化,并将优化的araA_o基因连接到pET-30a(+)表达质粒中构建重组质粒,采用相同的方法构建得到基因工程菌E.coli BL21(DE3)/pET-30a(+)-araA_o。结果表明,在相同培养条件下,优化后的菌株较未优化的表达量有明显提高,酶活提高了79.2%。

关键词

L-阿拉伯糖异构酶 / D-塔格糖 / 密码子优化

中图分类号

Q789

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张艳芳, 王晓茹, 张一帆, 张春枝. 产L-阿拉伯糖异构酶基因工程菌的构建及优化. 大连工业大学学报. 2024, 43(04): 257-260 https://doi.org/10.19670/j.cnki.dlgydxxb.2024.0404

基金

辽宁省教育厅科学研究经费项目(面上项目)(LJKZ0514)

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