长链脂酰辅酶A合成酶（LACS）基因家族是包含在酰基激活酶超家族中的一类，在脂肪酸合成代谢中具有重要的作用。基于紫花苜蓿基因组数据，采用生物信息学方法对紫花苜蓿LACS基因家族成员进行鉴定，构建系统发育树，进行理化性质、染色体定位、保守基序和基因结构、顺式作用原件及组织特异性表达分析，然后构建蛋白互作网络分析，通过qRT-PCR试验进行非生物胁迫表达分析。结果表明：在紫花苜蓿基因组中共鉴定得到10个MsLACS家族成员，分别位于5条染色体上；通过构建系统发育树，将MsLACS分为5支；保守基序分析发现12个不同的保守基序，Motif3构成了AMP保守结构域，MsLACS基因均含10～12个基序不等；基因结构分析发现，MsLACS基因结构大有不同，MsLACS基因的外显子数量为11～22个，所含内含子数量为0～3个不等，MsLACS1-1和MsLACS3不含内含子；MsLACS基因的启动子区域中主要有光反应元件、激素反应元件和非生物胁迫反应元件等；MsLACS基因在不同组织中表达不同，且具有明显的组织特异性；非生物胁迫表达分析表明：紫花苜蓿MsLACS基因对于干旱胁迫和盐胁迫响应水平整体较高，对冷胁迫响应水平偏低，表达量整体呈先升高后降低的起伏型，在叶片组织中偏高，根组织中较低；干旱和盐胁迫下，MsLACS基因在叶片中均高表达，胁迫时间段为6 h时，表达量水平整体达到最高；紫花苜蓿10个MsLACS基因共同互作，各蛋白与其他蛋白互作连线分别有18条，相互间有较强互作。研究结果可为探究紫花苜蓿中LACS基因表达以及胁迫育种提供一定研究基础。