为进一步挖掘高寒草地野生天蓝苜蓿根瘤菌资源，筛选与宿主植物高效共生的菌株。本研究利用YMA刚果红培养基从野生天蓝苜蓿中分离根瘤菌，通过菌落形态观察、产酸产碱反应结合16S rRNA基因序列分析进行菌株鉴定，原宿主回接验证其促生特性，离体耐酸、耐碱及温度耐受性测定菌株抗逆能力。结果表明：从野生天蓝苜蓿中分离得到4株菌株，菌落形态和产酸产碱结果符合根瘤菌特性，经鉴定菌株GNT1和GNT6为苜蓿中华根瘤菌，菌株GNT2为吉氏副根瘤菌，菌株GNT4为豆根副根瘤菌。4株根瘤菌回接后植株单株结瘤数、株高、根长及植株干重分别是不接种处理的2.06～3.64倍、0.75～3.17倍、0.21～0.38倍和0.55～2.82倍，有效结瘤数和固氮酶活性分别为11.33～18.00个、5.71～10.97μmol C2H4·g^-1·h^-1，不接种处理下根瘤为无效根瘤且不具有固氮酶活性。4株菌株均能在pH为11时生长，以菌株GNT2生长最佳；不同菌株对NaCl耐受能力不同，其中菌株GNT6耐受5%NaCl，且仅菌株GNT6在4℃低温下能够生长，具有在高寒草地应用的潜力。因此，筛选出的苜蓿中华根瘤菌GNT6可作为候选菌株为高寒草地的修复提供优良菌株资源。