【目的】以‘京枣39’愈伤组织为外植体进行遗传转化，建立枣树愈伤组织遗传转化体系，优化阳性植株鉴定方法。【方法】本研究以‘京枣39’愈伤组织为转化材料，利用含有报告基因eYGFPuv的改造载体，并通过根癌农杆菌介导方法转化，探究预培养时间、农杆菌菌液浓度、侵染时间、乙酰丁香酮浓度、共培养时间对转化率的影响，建立愈伤组织遗传转化体系并优化阳性植株鉴定方法。【结果】（1）卡那霉素对愈伤组织的最小致死质量浓度为30 mg/L。（2）遗传转化最佳处理条件为预培养时间为4 d，菌液OD₆₀₀为0.6，侵染时间20 min，乙酰丁香酮浓度100μmol/L，共培养时间为4 d;（3）阳性愈伤组织在365 nm紫外光下呈现明亮的荧光绿色，平均转化率达21.2%。【结论】经对比试验，成功建立了‘京枣39’愈伤组织遗传转化体系，为加速枣遗传转化提供了新的方法。