为研究中药左金丸水提取液对乳腺癌进展的影响,选用正常乳腺上皮细胞(MCF10A)、乳腺癌细胞(MCF7)、三阴性乳腺癌细胞(MB231)进行体外细胞实验研究。通过肿瘤细胞表型分析,证实左金丸对三阴性乳腺癌发展有显著抑制作用,可显著抑制其增殖能力、迁移能力、侵袭能力及克隆形成能力。同时,其对正常乳腺细胞无显著性影响。进一步通过蛋白筛选分析,发现左金丸可显著性提高MB231细胞ATG4B蛋白水平,并显著性促进细胞自噬进程。通过药物诱导体外实验,确认了激活自噬进程可显著抑制MB231细胞的肿瘤表型。此外,采用CRISPR/Cas9技术建立ATG4B敲除的MB231细胞株,将左金丸水提取液暴露该模型细胞后,发现左金丸对三阴性乳腺癌的抑制作用及对胞内自噬的调控能力均显著性减弱。结果表明:ATG4B蛋白是左金丸在三阴性乳腺癌MB231中的高特异性靶点,左金丸水提取液可显著提高ATG4B的表达,进而促进细胞自噬进程,抑制三阴性乳腺癌进展。