高产磷脂酶D的蜡样芽孢杆菌诱变筛选及发酵条件优化

王天一, 刘欢, 王芳, 邓利

北京化工大学学报(自然科学版) ›› 2023, Vol. 50 ›› Issue (05) : 71-79. DOI: 10.13543/j.bhxbzr.2023.05.008

高产磷脂酶D的蜡样芽孢杆菌诱变筛选及发酵条件优化

  • 王天一, 刘欢, 王芳, 邓利
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摘要

蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)是一种天然的磷脂酶D(PLD)生产菌株,为了提高PLD产量,以野生型蜡样芽孢杆菌(B.cereus CICC 20551)为出发菌,使用紫外线和硫酸二乙酯对其进行复合诱变,通过建立的PLD活性高效筛选方法,从大量突变样本中筛选得到一株高产PLD的蜡样芽孢杆菌S6-UD46。将该菌株摇瓶发酵48 h,产酶量达到0.52 U/mL,相比原始菌株(0.32 U/mL)提高了62.5%。对诱导产酶条件与培养基成分进行了优化,确定最佳发酵条件为:以20 g/L牛肉膏为氮源,10 g/L蔗糖为碳源,在600 nm波长下的光密度(OD_(600))达到4左右时加入40 g/L卵磷脂(磷脂酰胆碱含量>90%)对突变菌株S6-UD46进行诱导产酶,在37℃、200 r/min下培养48 h, PLD酶活性可达3.22 U/mL,是优化前的6.19倍。

关键词

磷脂酶D / 蜡样芽孢杆菌 / 诱变筛选 / 发酵条件优化

中图分类号

TQ925

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王天一, 刘欢, 王芳, 邓利. 高产磷脂酶D的蜡样芽孢杆菌诱变筛选及发酵条件优化. 北京化工大学学报(自然科学版). 2023, 50(05): 71-79 https://doi.org/10.13543/j.bhxbzr.2023.05.008

基金

国家自然科学基金(21978019/21978020)

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