目的：探讨鞘氨醇激酶1(SphK1)在槟榔碱相关口腔黏膜下纤维化发病机制中的功能作用及其相关机制。方法：通过槟榔碱刺激人口腔黏膜成纤维细胞(BMF)建立体外模型，并使用SphK1特异性抑制剂PF-543和转染SphK1过表达质粒(SphK1)、Smad2/3敲低(shSmad2/3)进行处理。通过蛋白质印迹、免疫荧光染色分析细胞上皮-间质转化(EMT)标志物表达，通过伤口愈合试验、Transwell侵袭试验检测细胞的迁移和侵袭能力。采用基因集富集分析法分析BMF中SphK1调节的潜在途径。结果：槟榔碱以时间和浓度依赖性方式增加BMF中SphK1的表达(P<0.05)。与对照组相比，槟榔碱组迁移和侵袭的细胞数量增加(P<0.05),并且BMF上皮标志物E-cadherin表达下调而间充质标志物Vimentin表达上调(P<0.05);PF-543组细胞迁移和侵袭的数量较槟榔碱组降低(P<0.05),并增加了BMF中的上皮标志物E-cadherin表达而降低了间充质标志物Vimentin表达(P<0.05)。基因集富集分析结果显示，转化生长因子-β(TGF-β)信号传导是SphK1过表达时最显著激活的途径。Smad2/3敲低有效地阻断了SphK1诱导的细胞迁移和侵袭(P<0.05),并逆转SphK1过表达细胞中下游EMT标志物的表达(P<0.05)。结论：SphK1通过TGF-β依赖性EMT参与口腔黏膜下纤维化恶性转化。