蛇毒是由蛇的毒腺分泌的复杂混合物，不仅可造成急性或慢性伤害，还是一个重要的生物活性分子库。精确识别蛇毒的各种成分对理解蛇咬伤的病理生理学机制及其在新药开发中的潜在应用至关重要。鉴于蛇毒成分复杂，精确识别蛇毒的各种成分非常困难。研究人员一直在努力开发稳定可靠、快速简便且具有良好特异性的蛇毒分析方法。其中色谱与质谱技术因其高分辨率和精确性，已成为蛇毒成分分离和鉴定的关键工具。此外，色谱与质谱技术的联合使用极大提升了蛇毒成分的检测和分析效果。本文综述了色谱与质谱技术在蛇毒分析中的应用，探讨了这些技术在揭示蛇毒复杂性及其生物活性方面的独特优势。